Técnicas de coloración

Hematoxilina-Eosina (H-E)

Intestino delgado
Intestino delgado H-E

Es la técnica más utilizada en la histología animal. La Hematoxilina, es un colorante básico que colorea estructuras ácidas de un azul purpureo o violeta.  Se teñirán de éste color los núcleos, el retículo endoplasmático rugoso, ribosomas, ya que tienen gran cantidad de ADN y ARN.

La eosina, es un colorante ácido que colorea las estructuras básicas, por ejemplo el citoplasma debido a que contiene en su mayoría proteínas básicas, se colorea de rosado.

Tricrómico Cajal-Gallego (TCG)

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Osificación Endocondral TCG

Las técnicas tricrómicas, se crean por la necesidad de detectar y diferenciar músculo y colágeno.

Se utilizan tres colorantes, dos citoplasmáticos o extracelulares y uno nuclear.

Las técnicas tricrómicas permiten observar granulaciones, y dan como resultado colores intensos con contrastes muy marcados.

En la TCG se utiliza como colorante nuclear la fuscina básica y como colorante citoplasmático el Índigo Carmín asociado al tricrómico ácido pícrico.

Con éstas técnicas el  colágeno se teñirá de azul, los citoplasmas se teñirán de amarillo, y el músculo se teñirá de de verde.

Reacción del ácido peryódico de Schiff (PAS)

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Células caliciformes teñidas con PAS

Las técnicas que tiñen de forma especifica componentes de las células y tejidos en base a una reacción química se denominan técnicas de tinción histoquímica.

Estas técnicas permiten comprender la función y estructura de las células y los tejidos.

La reacción de PAS, tiñe carbohidratos complejos de rojo oscuro (magenta) y se utiliza para demostrar glucógeno y mucus, y la membrana basal que subyace a los epitelios.

Las estructuras que se colorean con ésta técnica se denominan PAS positivas.

ejemplo: la mucina que producen las células caliciformes, se tiñe de magenta con PAS.

Doble Impregnación Argéntica:

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Fibras reticulares

Consiste en el deposito de sales de metales pesados (oro, osmio, plata) sobre ciertas células y tejidos, (impregnación)

Existen varias técnicas argénticas, y se debe seleccionar la más específica para la estructura que se desee estudiar.

Estas técnicas se utilizan para reconocer: fibras reticulares, y estructuras nerviosas.

Resorcina fuscina de Weigert y Orceína:

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Fibras elásticas

La Orceína y la Resorcina Fuscina son colorantes para las firbas elásticas. La Orceina es un colorante natural especifico para éstas fibras.

En esta coloracion el tipo de union predominante son las fuerzas de Van der Waals, responsables de la tinción.

Las firbas elásticas las veremos de color castaño oscuro-bordeau, y las demas estructuras  de marron palido.

Las fibras elásticas teñidas con Resorcina Fuscina de Weigert, se observaran en tono azulado-violaceo

Azul de Toluidina:

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Mastocito

Utilizando un solo colorante, algunas células o estructuras adquieren coloraciones diferentes, a esa propiedad se le denomina metacromasia.

Aunque la técnica no permite evidenciar la mayoría de los componentes celulares, se utiliza porque pone en evidencia al mastocito. Este aparece de color magenta, como se muestra en la imagen.

Bibliografía: Material del CBCC2, (2017), Facultad de Medicina UdelaR.

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